在線PH計應用領域廣泛，種類繁多，所以在測量時應按說明書規(guī)定的時間周期對儀器進行校準，其校準方法一般采用兩點校準法。
首先選擇兩種標準緩沖液：一種是pH7標準緩沖液，第二種是pH9標準緩沖液或pH4標準緩沖液。先用pH7標準緩沖液對電計進行定位，再根據(jù)待測溶液的酸堿性選擇第二種標準緩沖液。如果待測溶液呈酸性，則選用pH4標準緩沖液；如果待測溶液呈堿性，則選用pH9標準緩沖液。若是手動調節(jié)的在線PH計，應在兩種標準緩沖液之間反復操作幾次，直至不需再調節(jié)其零點和定位(斜率)旋鈕，在線PH計即可準確顯示兩種標準緩沖液pH值。則校準過程結束。
標準緩沖溶液溫度盡量與被測溶液溫度接近。
定位標準緩沖溶液應盡量接近被測溶液的pH值。或兩點標定時，應盡量使被測溶液的pH值在兩個標準緩沖溶液的區(qū)間內。
校準后，應將浸入標準緩沖溶液的電極用水特別沖洗，因為緩沖溶液的緩沖作用，帶入被測溶液后，造成測量誤差。
此后，在測量過程中零點和定位旋鈕就不應再動。若是智能式在線PH計，則不需反復調節(jié)，因為其內部已貯存幾種標準緩沖液的pH值可供選擇、而且可以自動識別并自動校準。但要注意標準緩沖液選擇及其配制的準確性。智能式0.01級在線PH計一般內存有三至五種標準緩沖液pH值，
其次，在校準前應特別注意待測溶液的溫度。以便正確選擇標準緩沖液,并調節(jié)電計面板上的溫度補償旋鈕,使其與待測溶液的溫度一致。不同的溫度下，標準緩沖溶液的pH值是不一樣的。
校準工作結束后，對使用頻繁的在線PH計一般在48小時內儀器不需再次定標。如遇到下列情況之一，儀器則需要重新標定：
(1)定位或斜率調節(jié)器被誤動；
(2)測量過酸(pH<2)或過堿(pH>12)的溶液后；
(3)換過電極后；
(4)溶液溫度與定標溫度有較大的差異時.
(5)電極在空氣中暴露過久，如半小時以上時.
(6)當所測溶液的pH值不在兩點定標時所選溶液的中間，且距7pH又較遠時。
記錄被測溶液的pH值時應同時記錄被測溶液的溫度值，因為離開溫度值，pH值幾乎毫無意義。盡管大多數(shù)在線PH計都具有溫度補償功能，但僅僅是補償電極的響應而已，也就是說只是半補償，而沒有同時對被測溶液進行溫度補償，即，全補償。
